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色谱在生命科学中的应用 - 廖杰等、钱小红、董方霆、张养军 编著
出版日期:2007年9月
生命科学是研究各种生命现象的本质、发生和发展的规律，以及各种生物之间、生物与环境之间相互关系的科学。近年来，生命科学研究取得了重大进展，并以其发展促进了农业、医学和其他相关领域的进步，而色谱作为一种不可缺少的工具和手段，在其发展过程中，发挥了至关重要的作用。遵照丛书主编傅若农教授的要求，我们对色谱在这一领域中的部分应用进行了综述，希望能为从事基础医学、临床化学和生物制药工作的研究人员和技术人员提供参考。
本书首先简要介绍了生命科学研究中常用的色谱技术，然后分别讨论了这些技术在脱氧核糖核酸分析、生物技术药物纯化与鉴定、生物标志物检测和蛋白质研究中的应用。全书共五章，由廖杰和钱小红统编，其中第一、三章由董方霆编写；第二章根据田惠君博士（DNA的电泳分析）和李鸿彪博士（DHPLC的原理及应用）提供的资料由廖杰编写；第四章由廖杰编写；第五章由张养军编写。
尽管本书名为《色谱在生命科学中的应用》，但由于篇幅和学识所限，在书中我们只选择了这一广阔领域中的几个方面加以论述，尚未论及的其他领域和研究范围同样非常重要，希望将来有机会能得到补充和完善。
在本书即将出版之际，衷心感谢在编写过程中，丛书主编傅若农教授、副主编刘虎威教授所给予的指导和帮助，感谢田惠君博士、李鸿彪博士提供DNA分析方面的详尽资料，感谢刘国诠教授在百忙之中对书稿进行审阅。
由于编者的水平和时间所限，书中一定会有不少疏漏，衷心希望广大读者予以批评指正。
编者2007年6月 第一章概述1
第一节液相色谱及其联用技术1
一、液相色谱技术1
二、联用技术4
第二节气相色谱及其联用技术5
一、色谱柱6
二、检测器6
三、选择气相色谱分离条件的一般原则6
四、气相色谱联用技术7
参考文献8
第二章脱氧核糖核酸（DNA）的电泳与色谱分析10
第一节DNA的提取和PCR扩增10
一、概述10
二、DNA提取 11
三、基因突变的检测12
第二节DNA的液相色谱分析17
一、DNA的变性高效液相色谱分析17
二、应用实例23
第三节DNA的电泳分析28
一、DNA的电泳分析28
二、应用实例33
参考文献39
第三章生物技术药物的纯化及鉴定46
第一节生物技术药物的分离纯化46
一、蛋白质药物的纯化46
二、核酸及寡核苷酸药物的纯化54
第二节蛋白质性质的鉴定58
一、纯度鉴定58
二、含量测定65
三、氨基酸组成分析65
四、N末端序列分析71
五、C末端序列分析78
六、等电点测定80
七、肽指纹图谱81
第三节核酸的性质鉴定83
一、核酸中碱基的分析84
二、LCMS分析寡核苷酸的纯度86
三、离子对反相色谱分析寡核苷酸阶梯序列87
第四节糖类生物药物分析88
一、糖类药物的分析89
二、多糖中单糖组成分析91
三、糖类分析中的气相色谱及其衍生化技术96
四、糖蛋白中糖的组成分析99
参考文献103
第四章生物标志物的色谱分析108
第一节样品的采集和预处理108
一、样品的采集和保存108
二、生物样品的一般预处理方法111
三、待测组分的提取113
四、几种常用的样品处理技术116
第二节体内氨基酸的测定118
一、体液氨基酸谱的HPLC分析118
二、LCMS/MS用于新生儿氨基酸代谢紊乱的筛查119
三、同型半胱氨酸的HPLC测定121
四、3甲基组氨酸的测定123
第三节体液中儿茶酚胺的测定124
一、体液中儿茶酚胺的分析及样品处理124
二、应用实例125
第四节体内天然甾体化合物的测定130
一、天然甾体化合物及其测定方法130
二、应用实例132
参考文献137
第五章色谱在蛋白质组学研究中的应用140
第一节前沿140
第二节生物样品的处理方法142
一、匀浆破碎142
二、固体研磨破碎法143
三、超声破碎法144
四、蛋白质清洗和提取144
第三节色谱方法在蛋白质预分离和鉴定中的应用145
一、色谱方法的预分离145
二、液质联用方法对整体蛋白质直接分析148
三、液质联用技术在整体蛋白质直接分析中的应用150
四、色谱预分离与液质联用技术在复杂蛋白质混合物分析中的应用154
第四节色谱方法在多肽分离和鉴定中的应用160
一、一维液质联用对简单肽混合物的分离鉴定160
二、二维液质联用对复杂多肽混合物的分离鉴定162
三、液质联用方法用于严重急性呼吸系统综合征冠状病毒结构蛋白
质的分析鉴定163
第五节色谱方法在翻译后修饰蛋白质组研究中的应用169
一、色谱在磷酸化修饰蛋白质组研究中的应用169
二、IMAC亲和提取结合生物质谱用于磷酸化修饰蛋白质的分析鉴定171
三、色谱方法在糖基化修饰蛋白质和多肽研究中的应用182
四、凝集素亲和色谱毛细管液相色谱质谱联用用于N糖基化修饰蛋白质及修
饰位点分析186
第六节色谱方法在定量蛋白质组研究中的应用简介190
参考文献193
符号表198 本书可供基础医学，临床化学和生物制药领域的研究人员、技术人员参考使用。 本书为色谱技术丛书中的一册，全书共有五章，简要介绍了目前在生命科学研究中常用的色谱技术，详细讨论了这些技术在脱氧核糖核酸分析、生物技术药物的纯化鉴定、生物标
志物检测，以及蛋白质组研究中的应用。
书中以较大的篇幅列举了各种应用实例，便于读者在实际工作中参考。
本书可供基础医学，临床化学和生物制药领域的研究人员、技术人员参考使用。
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