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化学前沿应用丛书——酶联免疫分析技术及应用 - 焦奎、张书圣
出版日期:2004年8月
酶联免疫分析是以生物酶为标记物的标记免疫分析法,它将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化放大作用相结合,既保持了酶催化反应的敏感性,又保持了抗原抗体反应的特异性,因而极大地提高了灵敏度。应用于医学检验、植物病毒检验、动物检疫检验、食品检验等,成为抗原抗体检测的强有力的手段。
本书主要是以近十几年酶联免疫分析的基础研究和应用研究以及国内外最新成果为素材的专著。全书共分7章。
第1章为免疫分析,由孙伟副教授撰写。介绍免疫分析的基本概念、原理及方法 。免疫分析是利用抗体与抗原的特异性结合作用来选择性识别和测定可以作为抗体或抗原的待测物,抗原抗体反应的特异性和专一性决定了免疫反应具有很高的选择性。本章内容包括抗原、抗体的概念、性质、分类及制备方法;抗原抗体结合反应的原理、特点及影响因素;免疫分析的类型及胶体金标记免疫分析、脂质体放大免疫分析等新方法。
第2章为免疫分析常用酶,由杨波副教授撰写。介绍酶的分类及特点,酶是生物催化剂,它们通过降低表面活化能来加快反应的进程。在反应过程中,酶自身并没有改变。几乎所有生物体在一定的条件下都可以合成多种多样的酶。生物体内的各种生化反应,几乎都是在酶的催化作用下进行的。所以,酶是生命活动的产物,又是生命活动必不可少的条件之一。本章内容包括酶的概念与发展历史;酶催化作用的专一性、高效性、所需条件的温和性等特点;酶的分类与命名;酶催化反应动力学及影响酶催化反应的因素;酶活性测定的方法及意义;最后举例说明免疫分析常用的一些酶。
第3章至第6章根据检测方法的不同分别介绍几种不同的酶联免疫分析方法。根据对酶催化反应产生的产物检测方法的不同,可以将酶联免疫分析方法分为光度酶联免疫分析、化学发光酶联免疫分析、荧光酶联免疫分析、电化学酶联免疫分析等。
第3章为光度酶联免疫分析,由牛淑妍副教授撰写。利用分光光度法对酶催化反应的产物进行检测是一种新型的免疫分析方法,从其建立到现在的三十多年里,光度酶联免疫分析技术已经日趋成熟。本章内容包括光度酶联免疫分析法(ELISA)的基本类型及其原理;ELISA法的发展及实验技术的改进;ELISA的实验条件、技术要点及质量控制;ELISA的应用及分析仪器等。
第4章为化学发光酶联免疫分析,由张书圣教授撰写。化学发光分析是根据化学反应产生的光辐射确定物质含量的一种痕量分析方法。如果此种反应存在或起源于活的生物体,则相应的分析方法称为生物发光分析。生物发光亦可视为特殊形式的化学发光。本章内容包括化学发光免疫分析概述、化学发光剂、化学发光酶联免疫分析的原理、类型及应用;生物发光酶联免疫分析;化学发光定量分析仪器等。
第5章为荧光酶联免疫分析,由张书圣教授撰写。利用具有潜在荧光的底物作为酶标抗体(或抗原),当此类底物被酶分解后,其产物可产生荧光,据此可以进行荧光酶联免疫分析。这种方法综合利用了酶联免疫技术中酶解产物测定所具有的累计放大性和荧光测量的高度敏感性,大大提高了分析方法的灵敏度。本章内容包括荧光免疫分析、荧光酶联免疫分析的原理、类型、荧光底物及荧光酶联免疫分析的应用等。
第6章为电化学酶联免疫分析,由孙伟副教授撰写。电化学免疫分析法是将免疫分析同电化学检测相结合的一种免疫分析新方法,它既具有电化学分析的高灵敏度,又具有免疫分析的高选择性和专一性,因此近年来发展较为迅速,在临床检测、植物病毒血清学检测、环境监测、食品分析等各个方面得到了广泛的应用。本章内容包括电化学免疫分析;伏安酶联免疫分析法、安培酶联免疫分析法的基本原理、类型及应用;电化学酶联免疫分析和其他技术的联用等。
第7章为酶免疫传感器,由孙伟副教授撰写。传感器是能感受规定的被测定量并按一定规律将其转换成为有用信号的器件或装置,它通常由直接响应于被测定量的敏感器件、产生可用信号输出的转换器件和相应的电子线路组成。本章内容包括生物传感器的原理与分类;酶免疫传感器的基本原理;电化学酶免疫传感器、光导纤维型酶免疫传感器、压电晶体型酶免疫传感器的基本原理、类型等。
全书由焦奎教授统稿。长春应用化学研究所汪尔康院士对本书作了序,编者谨向汪尔康院士致以衷心的谢意。
本书对从事分析化学、生物学、临床医学等领域的基础研究、应用研究人员提供了理解相关基本理论和技术的途径,也可作为相关专业研究生、本科生的教学参考书。
由于作者水平所限,有些方面可能还存在欠缺,不当之处在所难免,敬请同行和读者批评指正。
编者
2003年10月化学前沿应用丛书——酶联免疫分析技术及应用目录
第1章免疫分析
11抗原
111抗原的概念
112抗原的分类
113抗原的性质
114抗原的特异性与交叉反应
115抗原的制备方法
12抗体
121免疫球蛋白(Ig)的分子结构
122Ig的血清型与多样性
123Ig的生物学活性
124各类免疫球蛋白的特性与功能
125人工制备的抗体类型
126抗体的制备方法
13抗原抗体结合反应
131抗原抗体结合反应的原理
132抗原抗体结合反应的特点
133影响抗原抗体结合反应的因素
14免疫分析
141免疫分析的类型
142免疫分析的方法
143根据免疫分析中是否引入标记物进行分类
15非标记免疫分析
151沉淀反应
152免疫扩散
153免疫电泳
154免疫浊度
155凝集反应
16标记免疫分析
17免疫分析新方法
171胶体金标记免疫分析
172脂质体放大免疫分析
173流动注射免疫分析
174免疫PCR技术
175毛细管电泳免疫分析
176多组分免疫分析
177控温相免疫分析
178免疫微球分析法
参考文献
第2章免疫分析常用酶
21酶的基本概念与发展历史
211酶的基本概念
212酶的发展历史
213酶在生命活动中的作用
22酶催化作用的特点
221酶催化作用的专一性
222酶催化作用的高效性
223酶催化作用条件的温和性
23酶的分类与命名
231蛋白类酶的分类与命名
232核酸类酶的分类
24酶催化反应动力学
25影响酶催化反应的因素
251温度
252酸度
253底物及酶的浓度
254酶的活化
255酶活性的抑制
26酶活性的测定
261酶的活性单位
262酶的转换数与催化周期
263酶活性的测定方法
264酶活性测定的意义
27免疫分析常用酶
271过氧化物酶
272酸性磷酸酶
273碱性磷酸酶
274βD半乳糖苷酶
275葡萄糖氧化酶
276脲酶
277青霉素酶
278过氧化氢酶
279葡萄糖淀粉酶
2710碳酸酐酶
2711乙酰胆碱酶
2712葡萄糖6磷酸脱氢酶
2713溶菌酶
2714苹果酸脱氢酶
2715无机焦磷酸酶
2716荧光素酶
2717丙酮酸激酶
参考文献
第3章光度酶联免疫分析
31光度酶联免疫分析法(ELISA)的基本类型及原理
311双抗体夹心法
312间接法
313竞争法
314异种动物双抗体夹心法
315抗酶抗体法
316竞争性抑制法
317双夹心法
318抗原直接包被法
32ELISA法的发展
321斑点ELISA法
322单克隆抗体捕获ELISA法
323聚合酶链式反应ELISA法
324F(ab′)2ELISA法
325A蛋白法
326C1qELISA法
33ELISA法实验技术的改进
331快速ELISA诊断试剂盒
332双显色ELISA法
333振荡态ELISA法
334离心加速ELISA法
335磁微粒ELISA法
336其他快速ELISA法
337ELISA和其他分析技术结合
34ELISA放大系统
341生物素亲和素系统
342碱性磷酸酶放大系统
343凝血因子的级联放大系统
344微粒放大
345催化沉积
35ELISA实验条件和技术要点
351固相载体的选择和试剂的制备
352反应条件的选择和方法的标准化
36质量控制
361酶免疫测定的干扰因素与对策
362ELISA中阴性本底的形成原因和消除方法
363确定ELISA试验阳性临界值
364缩小ELISA检测误差
365结果分析
37ELISA的应用
371ELISA在医学检测中的应用
372ELISA在食品检测中的应用
373ELISA在水产品检测中的应用
374ELISA在植物病毒检测中的应用
375ELISA在动物检疫检测中的应用
376ELISA在农药残留检测中的应用
377ELISA在兽药残留检测中的应用
378ELISA在捕食作用研究中的应用
38ELISA分析仪器
381分离式酶联免疫仪器
382组合式的酶联免疫仪器
383Micro plate仪器发展的某些动态
参考文献
第4章化学发光酶联免疫分析
41化学发光免疫分析概述
411标记化学发光物质的化学发光免疫分析
412标记荧光物质的荧光化学发光免疫分析
413化学发光酶联免疫分析
414电化学发光免疫分析
42化学发光剂
421吖啶酯类化合物
422氨基苯二酰肼类化合物
423咪唑类化合物
424苯酚类化合物
425芳基草酸酯类化合物
43化学发光酶联免疫分析
431标记过氧化物酶的化学发光酶联免疫分析
432标记葡萄糖氧化酶的化学发光酶联免疫分析
433增强化学发光酶联免疫分析
44化学发光酶联免疫分析的应用
441化学发光酶捕获免疫测定大肠杆菌
442偶合反应化学发光酶联免疫分析测定人血清甲胎蛋白
443增强化学发光酶联免疫分析法测定人绒毛膜促性腺激素
444增强化学发光酶联免疫分析法测定血清中的铁蛋白
45生物发光酶联免疫分析
451荧光素酶FMN细菌生物发光体系
452荧光素荧光素酶生物发光体系
46化学发光定量分析仪器概述
461程控网络主要特点及应用方法
462ACS180化学发光分析系统
463ACS180化学发光免疫分析系统工作原理
参考文献
第5章荧光酶联免疫分析
51荧光免疫分析
511荧光免疫分析的原理
512几种常见的荧光标记物
513荧光免疫分析技术
52荧光酶联免疫分析
521荧光酶联免疫分析的原理
522荧光酶联免疫分析对荧光底物的要求
523荧光酶联免疫分析的仪器
524荧光酶联免疫分析与普通酶免疫分析的比较
53荧光酶联免疫分析的应用
531荧光酶联免疫分析测定血清中的肝癌细胞
532微粒子荧光酶联免疫分析法定量检测乙型肝炎E抗原
533氯化血红素作为模拟酶荧光免疫分析测定乙型肝炎表面抗原
534应用全自动荧光酶联免疫分析系统同时检测艾滋病毒抗体和p24抗原
535荧光酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎表面抗原及抗体
参考文献
第6章电化学酶联免疫分析
61电化学免疫分析
611异相电化学免疫分析法
612均相电化学免疫分析法
613电化学酶联免疫分析
62伏安酶联免疫分析法
621伏安法测定基本原理
622以HRP为标记酶的伏安酶联免疫分析法
623以AP为标记酶的伏安酶联免疫分析法
624其他酶标记的伏安酶联免疫分析法
625伏安酶联免疫分析法在植物病毒血清学检测中的应用
626伏安酶联免疫分析法在其他方面的应用
63安培酶联免疫分析法
631安培法测定基本原理
632安培酶联免疫分析常用的酶底物体系
633高效液相色谱安培酶联免疫分析
634流动注射安培酶联免疫分析
635毛细管电泳安培酶联免疫分析
636安培酶联免疫分析法的应用
64电化学酶联免疫分析和其他技术的联用
641毛细管电化学酶联免疫分析
642磁微粒电化学酶联免疫分析
参考文献
第7章酶免疫传感器
71生物传感器的原理与分类
711生物活性物质的分子识别功能
712生物活性物质的固定化技术
713信号转换器的基本类型
72酶免疫传感器的基本原理
721酶传感器
722免疫传感器
723酶免疫传感器
73电化学酶免疫传感器
731电化学信号转换器的基本原理
732电化学酶传感器
733电化学免疫传感器
734电化学酶免疫传感器
74光导纤维型酶免疫传感器
741光导纤维型信号转换器的基本原理
742光导纤维型酶传感器
743光导纤维型免疫传感器
744光学酶免疫传感器
75压电晶体型酶免疫传感器
751压电晶体型信号转换器的基本原理
752压电晶体型酶传感器
753压电晶体型免疫传感器
754压电晶体型酶免疫传感器
参考文献 本书对从事分析、检测、化验,生物技术,临床医学等领域的基础研究、应用研究人员提供了理解相关基本理论和技术的途径,也可作为相关专业研究生、本科生的教学参考书。化学前沿应用丛书——酶联免疫分析技术及应用内容介绍:
本书是《化学前沿应用丛书》分册之一。本书根据免疫分析的基本概念、原理及方法,并辅以免疫分析常用酶的分类及特点知识,对最主要的几种酶联免疫分析技术的方法及应用进行详尽的阐述,并介绍这一领域的新进展、新成果、新技术。本书既有丰富的基本理论,又有较强的实践指导意义。本书作者多年从事该领域研究,基础理论扎实,实践经验丰富。该书必将对酶联免疫分析的研究有所促进。
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