食品中苏丹红染料的测定
1 实验原理样品经溶剂提取、固相萃取净化后，用反相高效液相色谱—紫外检测器进行色谱分析，采用外标法定量。
2 方法技术参数：
3 实验试剂
3.1 蒸馏水（符合GB 6682-1992分析实验室用水规则和试验方法。）
3.2 本方法中未注明的试剂纯度为分析纯。
3.3 乙腈（色谱纯）
3.4 丙酮（分析纯、色谱纯）
3.5 甲酸
3.6 乙醚
3.7 无水硫酸钠
3.8 5％丙酮的正己烷液
3.9 层析用氧化铝（中性100目～200目）：105℃干燥2 h，于干燥器中冷却至室温每100g中加入2mL水降活，混匀后密封，放置12h后使用。
3.10氧化铝层析柱：在层析柱管底部塞入一层脱脂棉，干法装入处理过的氧化铝至3cm高，轻敲实后加一薄层脱脂棉，用10mL正己烷淋洗液，洗净柱中杂质后，备用。
3.11标准物质：苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ；纯度≥90％
3.12混合标准储备液：分别称取苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ各10.0mg（按实际含量折算），用乙醚溶解后用正己烷定容至10mL。此混合标准储备液浓度为1000 μg./mL，有效期为1年。
3.13混合标准物质中间液：吸取混合标准储备液1.0 mL，用正己烷定容至25mL，此混合标准中间液浓度为40 μg./mL，有效期为1年。
4 实验器材
4.1 层析柱管：1cm（内径）×5cm（高）的注射器管。
4.2 移液枪1 mL
4.3 聚四氟乙烯离心管40 mL
4.4 固相萃取装置
4.5 移液管5mL、1 mL、0.5 mL
4.6 平底烧瓶250 mL
5 实验仪器
5.1 液相色谱仪
5.2 台式高速低温离心机4.3 旋转蒸发仪
5.3 均质机
5.4 超声波清洗器
5.5 电子天平（感量0.1mg）
5.6 涡旋混合器
5.7 电热鼓风干燥箱
6样品制备：
将液体、浆状样品混合均匀，固体样品需磨细。
7 实验步骤
7.1 样品处理
7.1.1红辣椒粉等粉状样品
称取1g～5g（精确至0.001g）样品于三角瓶中，加入10 mL～30mL正己烷，超声5min，过滤，用10mL正己烷洗涤残渣数次，至洗初液无色，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至5mL以下，慢慢加入氧化铝层析柱中，为保证层析效果，在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样，在全程的层析过程中不应使柱干涸，用正己烷少量多次淋洗浓缩瓶，一并注入层析柱。控制氧化铝表层吸附的色素带宽宜小于0.5cm，待样液完全流出后，视样品中含油类杂质的多少用10mL～30mL正己烷洗柱，直至流出液无色，弃去全部正己烷淋洗液，用含5％丙酮的正己烷60mL洗脱，收集、浓缩后，用丙酮转移并定容至5mL，经0.45μm有机滤膜过滤后待测。
7.1.2红辣椒油、火锅料、奶油等油状样品
称取0.5g～2g（精确至0.001g）样品于小烧杯中，加入适量正己烷溶解（1mL～10mL），难溶解的样品可于正己烷中加温溶解。按6.1.1中“慢慢加入氧化铝层析柱中～过滤后待测”操作。
7.1.3辣椒酱、番茄沙司等含水量较大的样品
称取10g～20g（准确到0.01g）样品于离心管中，加10mL～20mL水将其分散成糊状，含增稠剂的样品多加水，加入30mL正己烷：丙酮＝3：1（V/V），匀浆3min，加入无水硫酸钠5g脱水，过滤后于旋转蒸发仪上蒸干并保持5 min，用5mL正己烷溶解残渣后，按6.1.1中“慢慢加入氧化铝层析柱中～过滤后待测”操作。
7.1.4香肠等肉制品
称取粉碎样品10g～20g（准确到0.01g）于三角瓶中，加入60mL正己烷充分匀浆5min，滤出清液，再以20mL×2次正己烷匀浆，过滤。合并3次滤液，加入5g无水硫酸钠脱水，过滤后于旋转蒸发仪蒸至5mL以下，按6.1.1中“慢慢加入氧化铝层析柱中～过滤后待测”操作。6.2色谱条件
7.2.1仪器条件
色谱柱：SB-C18（5 μm）4.6 mm×250 mm
流动相：溶剂A：0.1％甲酸的水溶液：乙腈＝85：15
溶剂B：0.1％甲酸的乙腈溶液：丙酮＝80：20（用前过0.45 μm滤膜）
流速：1.0 mL/min。
柱温：30℃
检测波长：苏丹红Ⅰ478nm、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ520nm；于苏丹红Ⅰ出峰后切换。进样量20μL 谢谢,正需要苏丹红的资料 欧盟的标准是 苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ478nm、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ520nm
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