蛋清提取溶菌酶新技术
溶菌酶又称胞壁质酶或N－乙酰胞壁质聚糖水解酶，是一种国内外很紧俏的生化物质，广泛应用于医学临床。具有多种药理作用，能抗感染、消炎、消肿、增强体内免疫反应等，有抗菌的作用，常用于治疗五官科多种粘膜炎症、皮肤科带状疱疹等疾病。是优良的天然防腐剂 ，可用于食品的防腐保鲜。尤其重要的是近年来溶菌酶已成为基因工程及细胞工程必不可少的工具酶。随着生物工程的发展，提取溶菌酶具有重要的战略意义。
目前医药工业上所用的溶菌酶主要是以蛋清为原料提取结晶，本文介绍简便提取溶菌酶的新方法。
一、药品原料：氯化钠、醋酸、氢氧化钠。以上原料均选用化学纯试剂。
二、设备：玻璃或陶瓷容器、pH计、细纱布、玻璃搅棒、胶头滴管、布氏漏斗等。
三、生产方法：
(1)收集鸡蛋清：将新鲜鸡蛋两端各敲一个小洞，使蛋清流出(最好是新生的鸡蛋、pH值不 得低于8，否则不能使用)，按其体积的两倍量加入水，轻轻搅拌5分钟，使蛋清溶液的稠 度均匀，注意在搅拌过程中不能起泡，搅拌不宜过快，搅拌棒应光滑等，以防蛋白质变性而 影响溶菌酶产品的得率及质量，最后用双层细纱布滤除蛋清溶液中的脐带块及碎蛋壳等。
(2)加入氯化钠：按每100毫升蛋清溶液加入2克氯化钠的比例，向蛋清溶液中慢慢加入氯化钠细粉，边加边搅拌，促使氯化钠细粉及时溶解，以避免局部浓度过高或沉淀于容器底部，否则会引起蛋白质的变性而产生大量的白色沉淀。
(3)粗制溶菌酶：加完氯化钠细粉后，再用1摩尔／升的氢氧化钠溶液小心地将上述蛋清溶液的pH值调节到10.8，在用氢氧化钠溶液调节蛋清溶液的pH值，用胶头滴管将其逐滴滴 入并不断搅拌，以免局部过碱而导致蛋白质的变性，从而影响溶菌酶的得率和质量。为加速 溶菌酶的结晶过程，可再加入适量的溶菌酶结晶体作为晶种。低温下静置数天，溶菌酶结晶将慢慢析出，于72－96小时达到最高产率。待结晶完全后，倾去上清液并用布氏漏斗滤出结晶，即可得到粗制的溶菌酶晶体。
(4)精制溶菌酶：将制得的粗结晶用pH值4.6的醋酸溶解，然后让酶液静置2小时，接着过滤除去不溶物，收集滤液并量出体积，按每100毫升滤液加5克氯化钠的比例加入(加入方法与第二步加入氯化钠的方法相同)，然后用1摩尔／升的氢氧化钠溶液缓慢地将其pH值调 节到10.8后，低温下静置结晶。为加速结晶过程可向酶液中加入溶菌酶晶种，待结晶完全 后再倾去上清液，用布氏漏斗过滤可得溶菌酶结晶，如纯度不高，可重复操作提纯，直至达到所需要的纯度为止，结晶于30－40度烘干后即得溶菌产品。
四、包装存贮：产品应装于玻璃或陶瓷容器中，置于阴冷处保存，以免溶菌酶受热后失去活性。
五、注意事项：
(1)整个过程只能在玻璃或陶瓷容器中进行，不可用金属容器，以免酶失活而影响产品的得率及质量。(2)操作的全过程要在低温下进行(10℃以下)，防止原料变质和 酶失活。(3)第三步中加入溶菌酶晶种的具体操作是将溶菌酶晶体均匀地悬浮于少量的pH值为10.8、浓度为5%氯化钠溶液中，取几滴加入到调好pH值和氯化钠浓度的蛋清液内，再置低温处结晶。[/post]
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