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[实验技术] 显色剂

本主题由 yyx11 于 2008-5-5 19:49 设置高亮

显色剂

薄层色谱显色时,糖的显色剂用什么呀?一般的显色方法不行!实验处于困惑中啊。。。。。。。。。。。?望请高人指点
2%硝酸银水溶液还原性糖可以,做木糖的纸层析时要用苯胺邻苯二甲酸盐作为显色剂,,有别的我就不知道了,要谁知道告诉我

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这方面的资料很多的,我曾经做过,一般都是混合显色剂,薄板展开后,需要喷上提前配好的显色剂,然后烘干。
现提供几种供参考。
①茴香胺、邻苯二酸试剂
  检出物:碳氢化合物。
  溶液:1.23g茴香胺及1.66g邻苯二酸于l00ml 95%乙醇中的溶液。
  方法:喷雾或浸渍。
  结果:己糖呈绿色、甲基戊糖呈黄绿色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。
  ②四乙酸铅/2,7一二氯荧光素
  检出物:甙类、酚类、糖酸类
溶液:I.2%四乙酸铅的冰醋酸溶液;Ⅱ.1%2,7一二氯荧光素乙醇溶液。
  取溶液I、Ⅱ 各5ml混匀,用干燥的苯或甲苯稀释至200ml,试剂溶液只能稳定2h。
  方法:浸板。
③邻氨基联苯/磷酸
  检出物:糖类。
  溶液:O.3g邻氨基联苯加85%磷酸5ml与乙醇95ml。
  方法:喷板后llOoC加热15~20min。
  结果:斑点呈褐色。
  ④苯胺/二苯胺/磷酸
  检出物:还原糖。
  溶液:4g二苯胺、4ml苯胺与20ml 85%磷酸共溶于200ml丙酮中。
  方法:喷后于85℃加热l0min。
结果:产生各种颜色。1,4-己醛糖、低聚糖呈蓝色。
  ⑤双甲酮/磷酸
  检出物:酮糖。
溶液:双甲酮(5,5-二甲基环己烷-1,3-二酮)10.3g溶于90ml乙醇与l0ml 85%磷酸中。
方法:喷板后于110oC加热15~20min。
结果:日光下观察,白色背景上呈黄色斑点,紫外光长波下呈蓝色荧光。
  ⑥联苯胺/三氯乙酸
  检出物:糖类。
溶液:0.5g联苯胺溶于l0ml乙酸,再加10ml40%三氯乙酸水溶液,用乙醇稀释至l00ml。
  方法:喷后置紫外光下照射15min。
结果:斑点呈灰棕-红褐色。
  ⑦对二甲氨基苯甲醛/乙酰丙酮
  检出物:氨基糖类。
溶液:I. 5ml 50%氢氧化钾溶液与20ml乙醇混匀,取此溶液0.5ml,加乙酰丙酮0.5ml与正丁醇50ml的混合液l0ml,此两种溶液均需新鲜配制,临用前混合;
     Ⅱ. 1g对二甲氨基苯甲醛溶于30ml乙醇中,再加30ml浓盐酸,需要时此溶液可用正丁醇180ml稀释。
  方法:先喷I后于105oC加热5min,再喷Ⅱ,然后于90℃干燥5min。
结果:斑点呈红色。

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