[实验技术] TLC技术原理与应用（五）

检出物：芳香胺类。
溶液：本品0.5g溶于95ml水，加乙酸5ml，滤去不溶物即得。
方法：喷后反应30min显色。
⑧葡萄糖／磷酸
检出物：芳香胺类。
溶液：葡萄糖2g溶于85％磷酸l0ml与水40ml混合液中，再加乙醇与正丁醇各30ml。
方法：喷后于115℃加热l0min。
(8)硝基及亚硝基化合物
①α-萘胺
检出物：3，5一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。
溶液：I．O．5％α-萘胺乙醇溶液；
    Ⅱ．10％氢氧化钾甲醇溶液。
方法：先喷溶液I，再喷溶液Ⅱ。
结果：呈红褐色斑点。
②二苯胺／氯化钯
检出物：亚硝胺类。
溶液：1.5％二苯胺乙醇溶液与0.1g氯化钯的0.2％氯化钠溶液lOOml，按5：1混合。
方法: 喷后置紫外光(254nm)下观察。
结果：显紫色斑点。
(9)氨基酸及肽类
①茚三酮
检出物：氨基酸、胺与氨基糖类。
溶液：本品O.2g溶于乙醇l00ml中。
方法：喷后于110oC加热。
结果：呈红紫色斑点。
②茚三酮／乙酸镉
检出物：氨基酸及杂环胺类。
溶液：茚三酮1g及乙酸镉2.5g溶于l0ml冰醋酸中，用乙醇稀释至500ml。
方法：喷后于120oC加热20min。
③1，2-萘醌-4-磺酸钠
检出物：氨基酸。
溶液：临用前将本品O.02g溶于5%碳酸钠l00ml中。
方法：喷后室温干燥。
结果：不同氨基酸呈不同色点。
④靛红／乙酸锌
检出物：氨基酸与某些肽类。
溶液：靛红1g与乙酸锌1g溶于95％异丙醇l00ml中，加热至80oC，冷却后加乙酸1ml，冰箱保存。
方法：喷后于80～85"C加热30min。   ．
⑤茚三酮／冰醋酸
检出物：二肽及三肽。
溶液：1％茚三酮吡啶溶液与冰醋酸按5：1混合。
方法：喷后于l00oC加热5min。
⑥香草醛
检出物：氨基酸及胺类。
溶液：I．本品1g溶于丙醇50ml中;
      Ⅱ．1mol／L氢氧化钾溶液lml，用乙醇稀释至lOOml。
方法：先喷溶液I后于110oC干燥l0min，再喷溶液Ⅱ，于110oC再干燥l0min，于紫外光(365nm)下观察。
(10)甾类
①香草醛／硫酸
检出物：甾体激素。
溶液：1％香草醛浓硫酸溶液。
方法：喷后于105℃加热5min。
②氯化锰
检出物：雌激素类。
溶液：氯化锰0.2g溶于含硫酸2ml的甲醇60ml中。
方法：喷后置紫外光(365nm)下观察。
③高氯酸
检出物：甾体激素。
溶液：5％高氯酸甲醇溶液。
方法：喷后于110oC加热5min，置紫外光(365nm)下观察。
④三氯化锑／乙酸
检出物：甾类与二萜类。
溶液：三氯化锑20g溶于乙酸20ml与氯仿60ml混合液中。
方法：喷后于100oC加热5min，紫外光长波下观察。
结果：二萜类斑点呈红黄-蓝紫色。
⑤对甲苯磺酸
检出物：甾族化合物、黄酮类与儿茶酸类。
溶液：20％本品的氯仿溶液。
方法：喷后于100oC加热数分钟，紫外光长波下观察。
结果：斑点呈荧光。
⑥氯磺酸／乙酸
检出物：三萜、甾醇与甾族化合物。
溶液：氯磺酸5ml在冷却下加乙酸l0ml溶解。
方法：喷后于130oC加热5～l0min，置紫外光长波下观察。
结果；斑点显荧光。
(11)糖类
①茴香胺、邻苯二酸试剂
检出物：碳氢化合物。
溶液：1.23g茴香胺及1.66g邻苯二酸于l00ml 95％乙醇中的溶液。
方法：喷雾或浸渍。
结果：己糖呈绿色、甲基戊糖呈黄绿色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。
②四乙酸铅／2，7一二氯荧光素
检出物：甙类、酚类、糖酸类
溶液：I．2％四乙酸铅的冰醋酸溶液；
  Ⅱ．1％2，7一二氯荧光素乙醇溶液。
取溶液I、Ⅱ 各5ml混匀，用干燥的苯或甲苯稀释至200ml，试剂溶液只能稳定2h。
方法：浸板。
⑧邻氨基联苯／磷酸
检出物：糖类。
溶液：O.3g邻氨基联苯加85％磷酸5ml与乙醇95ml。
方法：喷板后llOoC加热15～20min。
结果：斑点呈褐色。
④苯胺／二苯胺／磷酸
检出物：还原糖。
溶液：4g二苯胺、4ml苯胺与20ml 85％磷酸共溶于200ml丙酮中。
方法：喷后于85℃加热l0min。
结果：产生各种颜色。1，4-己醛糖、低聚糖呈蓝色。
⑤双甲酮／磷酸
检出物：酮糖。
溶液：双甲酮(5，5-二甲基环己烷-1，3-二酮)10.3g溶于90ml乙醇与l0ml 85％磷酸中。
方法：喷板后于110oC加热15～20min。
结果：日光下观察，白色背景上呈黄色斑点，紫外光长波下呈蓝色荧光。
⑥联苯胺／三氯乙酸
检出物：糖类。
溶液：0.5g联苯胺溶于l0ml乙酸，再加10ml40％三氯乙酸水溶液，用乙醇稀释至l00ml。
方法：喷后置紫外光下照射15min。
结果：斑点呈灰棕-红褐色。